Endonuclease IV（核酸内切酶IV）又称为Nfo，是一种多功能的核酸内切酶。它主要功能是识别DNA链中的脱嘌呤/脱嘧啶位点（AP位点），通过切割AP位点5'端的磷酸二酯键，产生3'-羟基和5'-脱氧核糖磷酸末端（dRP）（图1）。此外，该酶还具有在DNA的3´末端释放磷酸甘油醛、完整的脱氧核糖 5´-磷酸和磷酸的3'-二酯酶活性；以及在DNA链上从3'—5'方向移除核苷酸的3'-5'外切酶活性。
图1. Endonuclease IV反应原理示意图
Endonuclease IV可用于：
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FFPE样本修复中水解AP位点行成切刻，为DNA修复提供关键起始位点；
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单细胞凝胶电泳（彗星试验）；
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碱洗脱、碱解旋等。
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翌圣Endonuclease IV产品数据展示
翌圣酶研发团队潜心研发，成功推出市售Endonuclease IV(Cat#14543ES)，翌圣Endonuclease IV不含非特异性DNA酶残留，大肠杆菌宿主gDNA残留＜0.05 copies/10U。
01
不含非特异性DNase残留
20 μL反应体系中，加入不同批次的100 U Endonuclease IV和 0.5 μg λDNA-HindⅢ digest，37℃孵育16 h，琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化，表明翌圣Endonuclease IV不含非特异性DNase残留。
图2. 非特异性DNase残留
02
宿主(E.coli)gDNA残留＜0.05 copies/10U
对不同批次的翌圣Endonuclease IV进行宿主(E.coli)基因组DNA残留检测，结果显示翌圣Endonuclease IV的宿主gDNA残留＜0.05 copies/10 U。
图3. 宿主gDNA残留
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产品定位 |
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DNA损伤修复 |
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