胰岛素样生长因子1(IGF1),又称生长调节素C,是一种在分子结构上类似于胰岛素但其促生长活性更强于胰岛素的低分子肽。
据报道,IGF1能诱导多种细胞的增殖、迁移和分化,其中包括人乳腺癌细胞系MCF7。本实验通过观察IGF1活性蛋白对MCF7细胞系的促增殖作用来评估IGF1蛋白的活性。
实验方案:
1. 将MCF-7细胞接种到96孔板中,接种3复孔,调整每孔细胞数2000个,培养过夜待细胞贴壁;
2. 更换为无血清的DMEM培养基,并加入不同浓度的IGF1蛋白,培养72小时;
3. 在倒置显微镜下观察细胞增殖的情况,并用CCK-8试剂盒进行细胞增殖的检测(每孔加入10微升CCK-8溶液,加入CCK8后,避光37℃孵育1-4小时后,酶标仪检测波长为OD450 nm处吸光度值)
实验结果:
图 1. IGF1蛋白刺激MCF-7细胞的增殖
A. MCF-7细胞以10ng/ml IGF1蛋白刺激72小时后;
B. MCF-7细胞未加刺激。
图 2. IGF1蛋白对MCF-7细胞增殖的剂量效应曲线
实验结论:
云克隆IGF1活性蛋白可明显刺激MCF-7细胞的增殖。
参考信息:
云克隆IGF1活性蛋白货号:APA050Hu61
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